ГОСТ Р 51277-99 (ИСО 9648—88)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
СОРГО
Метод определения содержания таннинов
Издание официальное
БЗ 2-98/221
ГОССТАНДАРТ РОССИИ Москва
ГОСТР 51277—99
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом зерна и продуктов его переработки (ВНИИЗ)
ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 2 «Зерно, продукты его переработки и маслосемена»
2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 13 мая 1999 г. № 162
3 Настоящий стандарт, кроме раздела 2, представляет собой аутентичный текст ИСО 9648:1988 «Сорго. Определение содержания таннинов»
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
© ИПК Издательство стандартов, 1999
Настоящий стандарт нс может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Госстандарта России
II
ГОСТ Р 51277—99 (ИСО 9648—88)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
СОРГО
Метод определения содержания таннинов
Sorghum. Determination of tannin content
Дата введения 2000—01—01
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает универсальный метод определения содержания таннинов в зерне сорго
Метод не является специфическим только доя одного отдельного типа полифснолов. Его эффективность подтверждена высокой отрицательной корреляцией, которая наблюдается между энергией обмена веществ, установленной в биологических опытах при использовании зерна сорго в качестве корма для кур, и результатами, полученными данным методом.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты.
ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия
ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные Часть 1. Общие требования
ГОСТ 29143—91 (ИСО 712—85) Зерно и зернопродукты. Определение влажности (рабочий контрольный метод)
ГОСТ Р 50436—92 (ИСО 950—79) Зерновые. Отбор проб зерна
3 Сущность метода
Сущность метода состоит в экстрагировании таннинов диметилформамидом, центрифугировании и последующем их извлечении путем добавления аммоний-железо (1П) цитрата и аммиака к аликвотной части верхнего слоя жидкости и в спектрофотометрическом измерении оптической плотности полученного раствора при длине волны в 525 нм. Определение содержания таннинов проводят по градуировочному графику, построенному по дубильной кислоте.
4 Реактивы
Все реактивы должны бьггь квалификации чистый для анализа чл.а. Используют дистиллированную воду или воду, соответствующую по чистоте дистиллированной.
Издание официальное
ГОСТ Р 51277-99
4.1 Дубильная кислота, раствор концентрации 2 г/дм’.
Поскольку качество дубильной кислоты оказывает определенное влияние на градуировочный график, то при сопоставлении результатов, полученных в разных лабораториях, рекомендуется использовать дубильную кислоту фирмы «Merck» (номер 773 по фирменному каталогу)*.
Приготовленный раствор можно хранить одну неделю.
4.2 Аммиак, раствор NH3 концентрации 8,0 г/дм’.
4.3 Димстилформаммд, раствор концентрации 75 % (по объему).
Помешают 75 см3 диметилформамида в мерную колбу емкостью 100 см3. Разбавляют водой и после охлаждения доводят до метки.
Внимание: Диметилформамид вреден для здоровья при вдыхании или контакте с кожей. Он также раздражает глаза.
4.4 Аммоний-жслсзо (III) цитрат с содержанием железа от 17 до 20 % (по массе), раствор концентрации 3,5 г/дм\ приготовленный за 24 ч до использования.
Поскольку содержание железа в аммоний-жслсзо (III) цитрате оказывает влияние на результаты анализа, то это следует обязательно учитывать.
5 Аппаратура
При анализе используют следующую аппаратуру.
5.1 Механическая дробилка, обеспечивающая получение частиц, полностью проходящих через сито (5.2).
5.2 Сито с отверстиями размером 0,5 мм.
5.3 Центрифуга с фактором разделения 3000 (приблизительно 3000 g).
5.4 Пробирки для центрифугирования емкостью около 50 см’, с притертыми пробками, обеспечивающими герметичность закрывания.
5.5 Механическая мешалка с возвратно-поступательным движением или магнитная мешалка.
5.6 Механическая качалка для пробирок (типа «Vortex»).
5.7 Спскт|>офотомстр с кюветами толщиной 10 мм, позволяющий проводить измерения при длине волны в 525 нм.
5.8 Пипетки 1, 5 и 20 см’ по ГОСТ 29227.
5.9 Пипетки градуированные 5 и 10 см3 по ГОСТ 29227.
5.10 Пробирки типа П1 по ГОСТ 25336.
5.11 Колбы мерные 20 см3 по ГОСТ 1770.
6 Отбор проб
Отбор проб проводят в соответствии с ГОСТ Р 50436.
Зерно сорго, предназначенное для определения содержания таннинов. в высушенном виде можно хранить в течение 3 мес в защищенном от света месте.
7 Подготовка пробы к анализу
Из лабораторной пробы зерна сорго удаляют все посторонние примеси и измельчают зерно на механической дробилке (5.1) до получения частиц, полностью проходящих через сито (5.2). Продукт после измельчения тщательно перемешивают.
Так как танмины н измельченных продуктах быстро окисляются, анализ рекомендуется проводить сразу же после измельчения.
Примечание - Измельченный продукт можно хранить в течение 3 дней, если он защищен отсвета и высушен.
•Дубильная кислота фирмы «Merck» с каталожным номером 773 упомянута как пример коммерчески доступного препарата. Информация приведена для удобства пользования настоящим стандартом и нс должна рассматриваться как реклама упомянутого продукта.
8 Проведение анализа
8.1 Определение влажности анализируемой пробы зерна Влажность анализируемой пробы зерна определяют по ГОСТ 29143.
8.2 Навеска для анализа
Берут навеску анализируемой пробы зерна (раздел 7) массой около 1 г, взвешивают с погрешностью ±1 мг и помешают в пробирку для центрифугирования (5.4).
8.3 Проведение анализа
8.3.1 Пипеткой (5.8) отмеряют 20 см3 раствора диметилформамида (4.3) в пробирку для центрифугирования Герметично закрывают пробирку пробкой и перемешивают в течение (60+1) мин на мешалке (5.5). Затем цснтриф}тируют в течение 10 мин при 3000 g.
8.3.2 Отбирают пипеткой (5.8) 1 см3 жидкости из верхнего слоя (8.3.1) и переносят ее в пробирку (5.10). Последовательно туда же добавляют пипеткой 6 см3 воды и 1 см4 раствора аммиака (4.2), а затем встряхивают на качалке (5.6) в течение 10 с.
8.3.3 Отбирают пипеткой (5.8) 1 см3 жидкости из верхнего слоя (8.3.1) и переносят ее в пробирку (5.10) Последовательно туда же добавляют пипеткой 5 см3 воды и 1 см3 раствора аммоний-железс (III) цитрата (4.4), встряхивают в течение 10 с на качалке (5.6), затем добавляют пипеткой 1 см3 раствора аммиака (4.2) и снова встряхивают в течение 15 с на качалке (5.6).
8.3.4 Полученные в 8.3.2 и 8.3.3 растворы переносят в измерительные кюветы и через (10±1) мин после завершения операций по 8.3.2 и 8.3.3 измеряют на спектрофотометре (5.7) оптическую пл о гн ость раствора при длине волны 525 нм, используя в качестве контрольного ргютнорэ дистиллированную воду.
За результат определения принимают разницу между двумя значениями оптической плотности, полученными при измерении.
8.4 Количество определений
Из одной анализируемой пробы отбирают две навески и проводят два определения.
8.5 Построение градуировочного графика
Строят градуировочный график вдень измерений, как описано ниже:
а) готовят шесть мерных колб емкостью по 20 см3 и градуированной пипеткой (5.9) помешают в них. соответственно 0, 1, 2, 3, 4 и 5 см3 раствора дубильной кислоты (4.1). Доводят до метки раствором диметилформамида (4.3). Полученная таким образом калибровочная шкала соответствует содержанию дубильной кислоты 0; 0,1; 0.2; 0,3; 0,4 и 0,5 мг/см3;
б) в пробирки (5.10) отмеряют пипеткой по 1 см3 каждого из этих растворов и последовательно добавляют пипеткой (5.8) по 5 см3 воды и 1 см3 раствора аммоний-железо (III) цитрата (4.4). Встряхивают в течение 10 с на качалке. Затем добавляют no I см3 раствора аммиака (4.2) и снова встряхивают в течение 15 с на качалке (5.6).
Полученные таким образом растворы переносят в измерительные кюветы и через (10±1) мин оп|»едсляют на спскт|юфото.мстре оптическую плотность раствора при длине волны 525 нм. используя в качестве конт^юльного раствора дистиллированную воду.
в) строят пкшумровочный график, откладывая значения поглошения на ординате, а соответствующие концентрации дубильной кислоты в миллиграмма на кубический сантиметр (в пределах калибровочной шкалы) — на абсциссе.
Кривая не должна проходить через начало координат и сс нс следует корректировать с учетом нуля в выбранной шкале концентраций.
9 Обработка результатов анализа
Массовуюдолютаннинов X, %. (отношение массы дубильной кислоты к массе сухого вещества) определяют по формуле
v= 100
т * 100-Я *
где с— концентрация дубильной кислоты, найденная для испытываемого раствора по градуировочному графику, мг/см3 (8.5в);
т — масса навески, г (8.2);
Н — iVKDKHocTb анализируемой пробы (8.1).
ГОСТ Р 51277-99
За результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух определений, при условии обеспечения допустимых норм расхождении по сходимости, определяемых с помощью линейной интерполяции по таблице 1.
Таблица 1 — Процентное содержание дубильной кислоты на сухое вещество
Проба
Среднее арифметическое значение
Среднее квадратичное отклонение сходимости (,Т|)
I
| Коэффициент вариации сходимости, %
’ Сходимость (d)
j Среднее квадратичное отклонение военроит-•волимости (52)
Коэффициент вариации воспроизводимости, %
Воспроизводимость (D)
Сорт Арлжскс
0,05
Сорг НК 121
0,62
0,01 I 0,02
21 ; 3,3
0,03 0,06
0,02
44
0,06
0,03
4.S
0,ОХ
0,06
-------j
0,07 I
6,1
0,19 j
Сорт Султан !
0,02
1,9
10 Сходимость, воспроизводимость анализов
Во Франции проведены .межлабораторные испытания, в которых приняли участие девять лабораторий. Результаты восьми из них подвергнуты статистическому анализу. В каждой лаборатории проводилось по три измерения для одной и той же пробы. Результаты статистической обработки данных приведены в таблице I.
11 Отчет о результатах анализа
В отчете о результатах анализа должны быть указаны использованный метод, изготовитель и каталожный номер использованной дубильной кислоты, а также полученные результаты. Должны быть отмечены все оперативные детали, нс оговоренные в настоящем стандарте или считающиеся необязательными, а также вес случайные факторы, которые могут оказать влияние на результаты.
Отчет допжен включать всю ин<Ьормацию, необходимую для полной идентификации пробы.
УДК 633.174.001.4:006.354 ОКС 65.020.20 С19 ОКСТУ 9109
Ключевые слова: продукты сельскохозяйственные, зерно сорго, анализ химический, таннины, содержание таннинов, градуировочный график
Редактор Т.П. Шатина Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор Р.А. Ментова Компьютерная верстка С.В. Рябовой
Изд. лиц. № 021007 от 10.08.95. Сдано в набор 19 05.99- Подписано в печать 08.07.99. Усл.печл. 0,93. Уч.-нздл. 0,63. Тираж 333 экз. С 3286. Зак. 555.
ИНК Издательство стандартов, 107076, Москва, Колодезный нор., 14. Набрано в Издательстве на ПЭВМ
Филиал ИЛК Издательство стандартов — тип. “Московский печатник”, Москва, Лялин пер., 6 Плр № 080102