ГОСТ Р 54067-2010
Группа Н99
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПЕКТИН. ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Метод экспресс-идентификации пектинов
Pectin. Identification. Method of the express-identification of pectins
ОКС 67.080.01
ОКСТУ 9709
Дата введения 2012-01-01
Предисловие
Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения"
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Государственным образовательным учреждением высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" Министерства образования и науки Российской Федерации (ГОУ ВПО "МГУПП")
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 154 "Пищевые добавки и ароматизаторы"
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 ноября 2010 г. N 703-ст
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет
1 Область применения
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на пищевую добавку пектин (Е440) (далее по тексту - пектин), применяемый в производстве пищевых и непищевых продуктов, и устанавливает качественный метод экспресс-идентификации пектинов.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ Р 8.563-96* Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений
_______________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ Р 8.563-2009. - .
ГОСТ Р 51806-2001 Пектин. Термины и определения
ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.1.010-76 Система стандартов безопасности труда. Взрывобезопасность. Общие требования
ГОСТ 12.1.018-93 Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования
ГОСТ 12.1.019-2009* Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
_______________
* Вероятно, ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ Р 12.1.019-2009, здесь и далее по тексту. - .
ГОСТ 450-77 Кальций хлористый технический. Технические условия
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия
ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины и определения по ГОСТ Р 51806.
4 Сущность метода
Метод основан на деэтерификации анализируемой пробы в щелочной среде, с ее последующим ферментативным гидролизом и фотометрическим измерением продуктов гидролиза при 235 нм.
Увеличение разницы между значениями оптической плотности раствора пробы в начале и конце ферментативного гидролиза более чем на 0,023 единицы позволяет идентифицировать пробу как пектин.
5 Средства измерений, оборудование, реактивы, стандартные вещества, растворы, посуда
Весы лабораторные с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания ±0,1 г.
Дозаторы калиброванные автоматические или пипетки стеклянные калиброванные с подходящим интервалом дозирования.
Спектрофотометр или фотометр с шириной спектральной полосы не более 10 нм и допустимой абсолютной погрешностью измерений оптической плотности не более 1%, позволяющий проводить измерения при 235 нм.
Кюветы из кварцевого стекла рабочей длиной 10 мм.
рН-метр с погрешностью измерения не более 0,05 рН.
Колбы мерные по ГОСТ 1770, исполнения 2, вместимостью 100 и 1000 см.
Стакан по ГОСТ 25336 типа В, исполнения 1, вместимостью 100 см.
2-Пропанол, х.ч.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.
Кислота соляная по ГОСТ 3118.
Трис(гидроксиметил)аминометан, х.ч.
Кальций хлористый по ГОСТ 450.
Препарат пектатлиазы.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками, вспомогательного оборудования с техническими характеристиками, а также реактивов по качеству, не хуже вышеуказанных.
6 Подготовка к проведению анализа
6.1 При подготовке и проведении анализа должны быть соблюдены следующие условия:
температура окружающей среды | от 10 °С до 25 °С; | ||
относительная влажность воздуха | от 40% до 70%. |
6.2 Приготовление раствора гидроокиси натрия молярной концентрации (NaOH)=0,5 моль/дм
20,005 г сухой гидроокиси натрия растворяют в 500 см дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см, затем объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой.
Срок хранения раствора - не более 1 мес.
6.3 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации (HCl)=0,5 моль/дм
В мерную колбу вместимостью 1000 см вносят 41,2 см (или 49,02 г) концентрированной соляной кислоты, добавляют 500 см дистиллированной воды, тщательно перемешивают, доводят объем раствора в мерной колбе до метки.
Срок хранения раствора - не более 1 мес.
6.4 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации (HCl)=1,0 моль/дм
В мерную колбу вместимостью 1000 см вносят 82,4 см (или 98,04 г) концентрированной соляной кислоты. Добавляют 500 см дистиллированной воды, тщательно перемешивают и доводят объем раствора в мерной колбе до метки.
Срок хранения раствора - не более 6 мес.
6.5 Приготовление буферного раствора активной кислотностью рН 7,0
6,055 г сухого трис(гидроксиметил)аминометана и 0,147 г кальция хлористого растворяют в 500 см дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см. После растворения реактивов рН раствора доводят до значения 7,0 при помощи добавления раствора соляной кислоты молярной концентрацией (HCl)=1,0 моль/дм по 6.3. После корректировки рН доводят объем буферного раствора в мерной колбе дистиллированной водой до метки.
Срок хранения раствора - не более 1 мес.
6.6 Приготовление раствора пектатлиазы
0,5 г препарата пектатлиазы растворяют в стакане вместимостью 100 см в 50 см буферного раствора по 6.4. Раствор пектатлиазы готовят непосредственно перед проведением испытания.
7 Проведение анализа
7.1 Проведение деэтерификации пробы в щелочной среде
0,05 г анализируемой пробы вносят в мерную колбу вместимостью 100 см. Поверхность пробы равномерно увлажняют 2-пропанолом. В колбу добавляют 50 см дистиллированной воды. Тщательно перемешивают содержимое энергичным встряхиванием. С помощью раствора гидроокиси натрия молярной концентрации (NaOH)=0,5 моль/дм по 6.1 доводят рН раствора в колбе до значения 12,0. Тщательно перемешивают содержимое колбы и оставляют для завершения реакции деэтерификации на 15 мин при комнатной температуре. Затем объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой.
7.2 Для проведения анализа в три кюветы из кварцевого стекла дозируют реактивы в соответствии со схемой, приведенной в таблице 1.
Таблица 1
в см
Наименование кюветы | Раствор буферный | Объем пробы | Дистиллированная вода | Раствор пектатлиазы |
" | 0,5 | 1,0 | 1,0 | - |
" | 0,5 | - | 1,5 | 0,5 |
"Проба" | 0,5 | 1,0 | 0,5 | 0,5 |
" 
"
Общий объем инкубационной смеси в каждой кювете составляет 2,5 см. После добавления в кюветы всех реактивов содержимое перемешивают стеклянными палочками и измеряют в каждой кювете при 235 нм на спектрофотометре (фотометре) начальное значение оптической плотности смеси . Оставляют кюветы на 10 мин при комнатной температуре.
Проводят измерение при 235 нм на спектрофотометре (фотометре) конечного значения оптической плотности смеси в каждой кювете.
8 Обработка результатов измерений
8.1 Расчет общего начального значения оптической плотности, 
, рассчитывают по формуле
, (1)
где - начальное значение оптической плотности смеси в кювете "Проба";
- начальное значение оптической плотности смеси в кювете "
";
- начальное значение оптической плотности смеси в кювете "
"
8.2 Расчет общего конечного значения оптической плотности, 
, рассчитывают по формуле
, (2)
где 
- конечное значение оптической плотности смеси в кювете "Проба";
- конечное значение оптической плотности смеси в кювете "
";
- конечное значение оптической плотности смеси в кювете "
".
8.3 Расчет разницы между общими значениями начальной и конечной оптической плотности
Разницу , между общими значениями начальной 
и конечной 
оптической плотности рассчитывают по формуле
. (3)
Значение разницы оптических плотностей должно составлять более 0,023 ед. Если значение 0,023 ед., испытуемая проба не является пектином.
9 Требования безопасности
При проведении анализа следует соблюдать:
- требования электробезопасности - в соответствии с ГОСТ 12.1.019;
- требования пожаровзрывобезопасности статического электричества - в соответствии с ГОСТ 12.1.018;
- требования взрывобезопасности - в соответствии с ГОСТ 12.1.010;
- требования безопасности при работе с чистыми веществами, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами, - по ГОСТ 12.1.007.
Контроль за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны следует проводить в соответствии с ГОСТ 12.1.005.
К проведению анализов допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже среднего технического образования, владеющие навыками проведения анализов и изучившие инструкции по эксплуатации используемой аппаратуры.
Электронный текст документа
и сверен по:
официальное издание
М.: Стандартинформ, 2011