ГОСТ 27785-88
Группа Р39
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
ПРЕПАРАТЫ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СУХИЕ
Метод определения кислорода во флаконах с препаратом
Biological dry compounds. Method for determination of oxygen content in bottles of compound
ОКСТУ 9380
Срок действия с 01.07.89
до 01.07.94*
______________________________
* Ограничение срока действия снято
по протоколу N 3-93 Межгосударственного Совета
по стандартизации, метрологии и сертификации
(ИУС N 5/6, 1993 год). -
.
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Государственным агропромышленным комитетом СССР
ИСПОЛНИТЕЛИ
Ю.П.Чернецкий, канд. техн. наук (руководитель темы); Ю.А.Рябков; Ю.Г.Опарин; В.В.Желтов, канд. вет. наук; Е.В.Пронина, канд. хим. наук; Н.В.Алкеев, канд. физ.-мат. наук
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 26.07.88 N 2751
3. Срок первой проверки - 1995 г.
4. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
5. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
Обозначение НТД, на который дана ссылка | Номер раздела |
ГОСТ 427-75 | 2 |
ГОСТ 3399-76 | 2 |
ГОСТ 5072-79 | 2 |
ГОСТ 9293-74 | 2 |
ГОСТ 6709-72 | 2 |
ГОСТ 6613-86 | 2 |
ГОСТ 7852-76 | 2 |
ГОСТ 20292-74 | 2 |
ГОСТ 25336-82 | 2 |
ГОСТ 25377-82 | 2 |
ГОСТ 25706-83 | 2 |
Настоящий стандарт распространяется на сухие биологические препараты, применяемые в ветеринарии, и устанавливает хроматографический метод определения количества кислорода, содержащегося в заполненных азотом и герметично закрытых флаконах с сухими биологическими препаратами.
Сущность метода заключается в отборе пробы газа из флакона с сухим препаратом, вводе ее в хроматограф, получении на хроматограмме двух разделенных пиков кислорода и азота и количественном определении кислорода.
1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ
1.1. Для проведения испытания из серии готового препарата методом случайного отбора из разных мест берут 3 флакона с сухим препаратом.
1.2. Взятые флаконы проверяют на целостность и герметичность, тщательно осматривая поверхности флаконов с целью выявления трещин, а также проверяя плотность прилегания закатанного колпачка и резиновой пробки. Флаконы с трещинами или дефектами укупоривания для испытания не используют.
2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ
Хроматограф газовый марки ЛХМ-8МД или других аналогичных марок с детектором по теплопроводимости и газохроматографической колонкой диаметром 3,0 мм и длиной 1000 мм.
Печь муфельная с температурой нагрева до 1000°С.
Измеритель расхода газа с бюреткой 4-1-50 по ГОСТ 20292-74.
Секундомер СДС-пр-1 по ГОСТ 5072-79.
Шприц медицинский типа "Рекорд" вместимостью 1 см или микрошприц марки МШМЛб2.793.014 к хроматографу ЛХМ-8МД.
Сетки проволочные тканые с ячейками 0,3-0,5 мм по ГОСТ 6613-86.
Лупа измерительная 10 типа ЛПИ-457 по ГОСТ 25706-83.
Эксикатор диаметром 250 мм по ГОСТ 25336-82.
Ступка фарфоровая.
Линейка металлическая длиной 30 см по ГОСТ 427-75.
Сита молекулярные - цеолит синтетический марки СаА зернением 0,3-0,5 мм.
Игла медицинская 0840 по ГОСТ 25377-82.
Трубка резиновая медицинская внутренним диаметром 4,22 мм, длиной 10 м по ГОСТ 3399-76.
Бутыль вместимостью 3000 см.
Пробка резиновая по ГОСТ 7852-76.
Масло силиконовое.
Гелий.
Азот газообразный особой чистоты по ГОСТ 9293-74.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. Подготовка колонки
Синтетический цеолит измельчают в фарфоровой ступке, отсеивают на ситах порошок дисперсностью 0,3-0,5 мм, промывают его дистиллированной водой для удаления пыли, высушивают и прокаливают в муфельной печи в течение 2 ч при температуре 450-500 °С, затем охлаждают в эксикаторе на сетках до комнатной температуры.
Хроматографическую колонку устанавливают вертикально и засыпают синтетическим цеолитом, уплотняя его вибратором или легким постукиванием снизу. Колонку не досыпают на 1 см и закупоривают сеткой. Заполненную колонку устанавливают в термостате хроматографа и, не присоединяя к детектору, пропускают через нее поток гелия или азота особой чистоты (30-40 см/мин) в течение 3 ч при температуре 160-180 °С. Затем колонку присоединяют к детектору и продолжают через нее пропускать гелий или азот, пока не прекратится дрейф нулевой линии при максимальной чувствительности детектора.
3.2. Подготовка хроматографа
Подготовку хроматографа к работе и включение выполняют в соответствии с заводской инструкцией. Режим работы хроматографа осуществляется при следующих параметрах:
Температура колонки | 40°С |
Температура детектора | 60°С |
Скорость газа-носителя гелия: | |
в измерительной колонке | 60 см/мин |
в колонке сравнения | 30 см/мин |
Скорость диаграммной ленты | 2400 мм/ч |
Объем пробы, подаваемой в испаритель: | |
для шприца "Рекорд" | от 150 до 250 дм |
для шприца МШМЛб2.793.014 | 60 дм |
В зависимости от предполагаемой объемной доли кислорода и объема пробы выбирают ток и чувствительность детектора в соответствии с таблицей.
Объемная доля кислорода, % | Объем пробы, дм | Ток детектора, мА | Чувствительность | |
Кислород | Азот | |||
Св. 0,05 до 0,5 включ. | 60 | 170±5 | 1/3 | 1/100 |
150-250 | 140±2 | 1/3 | 1/100 | |
Св. 0,5 до 5,0 включ. | 60 | 170±5 | 1/10 | 1/100 |
150-250 | 140± 2 | 1/10 | 1/100 | |
Св. 5,0 | 60 | 150±5 | 1/10 | 1/10 |
150-250 | 110±2 | 1/10 | 1/10 | |
При отсутствии данных об объемной доли кислорода во флаконах испытание проводят при максимальной чувствительности детектора.
Готовность хроматографа к анализу и его работоспособность проверяют, используя в качестве газовой пробы атмосферный воздух.
3.3. Подготовка флакона с препаратом к испытанию
Для отбора пробы газа из флакона с препаратом выравнивают давление газа во флаконе с атмосферным давлением. Выравнивание давлений проводят азотом, который подается из баллона через редуктор под давлением 10 КПа (0,1 кгс/см) по резиновому шлангу в ресивер-бутыль вместимостью не менее 3000 см, а из него по резиновому шлангу в медицинскую иглу, которой прокалывают резиновую пробку испытуемого флакона. Перед прокалыванием иглой пробки флакона азот пропускают через систему хроматографа в течение 30 мин с целью удаления остатков воздуха в ней и проверяют чистоту выходящего азота на содержание в нем кислорода на хроматографе. Затем перекрывают подачу азота в ресивер и спустя 15 с прокалывают иглой пробку флакона, выравнивая давление в нем с атмосферным. Через 2-3 с иглу из пробки извлекают.
3.4. Подготовка медицинского шприца
3.4.1. Предварительно устанавливают на штоке шприца металлическую трубку диаметром 4 мм, длиной 30 мм для ограничения хода поршня с целью достижения объема под поршнем 150-250 мкл и проверяют шприц на герметичность. Для этого шприц с плотно надетой иглой вкалывают в резиновую пробку, погружают всю иглу с канюлей и наконечником шприца в воду и при легком надавливании на поршень следят за появлением пузырьков воздуха. Если пузырьки воздуха не выходят в месте соединения канюли иглы со шприцем и поршень не подается при нажатии на него, шприц следует считать герметичным для анализа. В целях уплотнения и легкости хода поршня перед его использованием слегка смазывают внутреннюю поверхность цилиндра шприца в нижней его части тонким слоем силиконового масла.
3.4.2. Подготовленным к отбору газа медицинским шприцем с иглой прокалывают резиновую трубку, по которой выходит гелий из колонки сравнения хроматографа, и дважды медленно шприцем набирают и выпускают гелий. В третий раз, набрав гелий в шприц и расположив его иглой вниз, отбирают пробы газа из флакона с препаратом.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
4.1. Из каждого флакона отбирают две пробы газа и последовательно одну за другой, с интервалом 3-4 мин, вводят в испаритель хроматографа. Для этого прокалывают резиновую пробку флакона, выдавливают гелий из шприца во флакон и спустя 1-2 с набирают под поршень шприца пробу газа. Шприц извлекают из пробки флакона и быстро переносят к испарителю хроматографа в вертикальном положении. Точно по центру канала прокалывают иглой шприца прокладку испарителя и вводят в испаритель хроматографа.
Пробу в испаритель вводят плавным нажатием пальца на шток с таким расчетом, чтобы поршень двигался плавно с одинаковой скоростью для всех вводимых проб. Извлекают иглу шприца из испарителя также плавно, удерживая шприц в вертикальном положении.
Через 110-120 с после ввода пробы на хроматограмме самописец вычерчивает пик кислорода, а затем пик азота. Если какой-либо из пиков не укладывается в размер ширины диаграммной ленты или его размер мал, следует изменить чувствительность хроматографа в соответствии с заводской инструкцией.
Через 20-25 проколов следует заменить резиновую прокладку испарителя на новую.
5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. Рассчитывают площадь пиков кислорода и азота. Для этого на хроматограмме измеряют высоту и ширину пиков кислорода и азота с помощью металлической линейки длиной 30 см, увеличительной лупы и жесткого острозаточенного карандаша. Высоту пиков измеряют от базовой линии до вершины пика, ширину пика - на половине его высоты. При измерениях берут расстояние от внутренней толщины линии пика до наружной.
Площадь пиков кислорода () и азота () в квадратных миллиметрах вычисляют по формулам:
;
,
где , - высота пиков кислорода и азота, мм;
, - ширина пиков кислорода и азота, мм.
5.2. Объемную долю кислорода () в процентах в каждой пробе газа вычисляют по формуле
,
где , - площади пиков кислорода и азота, мм.
5.3. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов определений в трех флаконах препарата.
Относительная приведенная погрешность метода при доверительной вероятности Р = 0,95 не должна превышать 10%.
Электронный текст документа
и сверен по:
М.: Издательство стандартов, 1988