Группа CI9
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
КОРМА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ
Спектрофотометрический метод определения общего содержания фосфора
ГОСТ
28902-91 (ИСО 6491-80)
Animal feeding stuffs. Determination of total phosphorus content. Spectrophotometric method
ОКСТУ 9709
Дата введения 01.01.92
1. ОБЛАСТЬ РАСПРОСТРАНЕНИЯ
Настоящий стандарт распространяется на корма для животных и устанавливает спектрофотометрический метод определения общего содержания фосфора в кормах для животных.
2. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Спектрофотометрический метод применяют при определении содержания фосфора во всех видах кормов для животных и особенно при проведении анализа продуктов с низким содержанием <|юс(|юра.
3. СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Испытуемую навеску корма озоляют либо путем сжигания в пламени (сухое окисление) и растворении золы в кислоте для кормов с большим содержанием органических веществ, либо минерализацией в кислоте (влажное сжигание) для кормов с содержанием неорганических веществ и жидких кормов.
Полученный кислотный раствор обрабатывают раствором молибдованадата и измеряют спектральную поглощающую способность полученного таким образом желтого раствора с помощью спектрофотометра при длине волны в 430 нм.
4. РЕАКТИВЫ
Все реактивы должны быть аналитического качества, вода должна быть дистиллированная или эквивалентной чистоты.
4.1. Карбонат кальция.
4.2. Соляная кислота, раствор молярной концентрацией с(НС1) = 6 моль/дм3.
4.3. Азотная кислота, раствор молярной концентрацией c(HNOj) = 1 моль/дм3.
4.4. Азотная кислота р2о 1,38 г/см3.
4.5. Серная кислота р20 1 *84 г/см3.
4.6. Реактив молибдованадата. готовят следующим образом: в мерной колбе вместимостью 1000 см3 смешивают 200 см3 раствора гептамолибдата аммония (п. 4.6.1). 200 см3 раствора монованадата аммония (и. 4.6.2) и 135 см3 азотной кислоты (п. 4.4). Полученный раствор доливают водой до метки.
4.6.1. Раствор гептамолибдата аммония; готовят следующим образом:
растворяют в горячей воде 100 г гепта молибдата аммония 4-водного |(1ЧН4)бМо7О24-4Н2О]. добавляют 10 см3 аммиака рго 0.91 г/см3 и раствор доливают водой до 1 см3.
Издание официальное 11ереиечатка воскрешена
4.6.2. Раствор монованадата аммония; готовят следующим образом:
растворяют 2.35 г монованадата аммония (NH4VO5) в 400 см5 горячей воды. Постоянно помешивая, медленно добавляют 20 см3 разбавленной азотной кислоты (7 см3 азотной кислоты (и. 4.4) с 13 см3 воды). Полученный раствор доводят водой до 1 дм3.
4.7. Фосфор, стандартный раствор, содержащий 1 мг/см3 фосфора; готовят следующим образом:
в мерной колбе вместимостью 1000 см3 растворяют в воде 4.394 г дигидрофосфата калия (КН2РО4). предварительно высушенного при 103 ’С. Раствор доливают водой до метки.
5. АППАРАТУРА
5.1. Тигель фарфоровый для сжигания.
5.2. Печь электрическая муфельная с температурой жпрева (550±20) *С.
5.3. Колба Кьельдаля вместимостью 250 см3.
5.4. Колбы мерные с одной отметкой вместимостью 500 и 1000 см3.
5.5. Спектрофотометр с кюветами вместимостью 25 и 30 см3, снабженные пробками из матового стекла.
5.6. Пробирки стеклянные вместимостью 25 см3.
5.7. Баня песчаная.
5.8. Мензурка вместимостью 250 см3.
5.9. Пипетки градуированные.
5.10. Весы аналитические.
6. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
6.1. Приготовление навески пробы и подготовка раствора для испытания
В соответствии со свойством корма испытуемую пробу подготавливают по п.п. 6.1.1 или
6.1.2.
6.1.1. Озоление навески сухим сжиганием
Взвешивают в тигле 2.5 г пробы с погрешностью ±1 мг. Тщательно смешивают испытуемую навеску с 1 г карбоната кальция (и. 4.1). Сжигают в печи (п. 5.2) при температуре (550±20) *С до появления белой или серой золы (небольшое количество углерода не является помехой).
Переносят золу в мензурку вместимостью 250 см3 (и. 5.8). Добавляют 20 см3 воды и затем соляной кислоты (п. 4.2) до тех пор. пока не прекратится бурное выделение газа. Добавляют еще 10 см3 соляной кислоты (п. 4.2). Мензурку помешают в песчаную баню (п. 5.7) и выпаривают до полного высушивания, чтобы получился нерастворимый кремниевый ангидрид.
К остывшему остатку добавляют 10 см3 азотной кислоты (п. 4.3) и кипятят на песчаной бане в течение 5 мин. не выпаривая. Раствор кислоты профильтровывают (от осадка) в мерную колбу вместимостью 500 см3 (и. 5.4). промывают мензурку несколько раз горячей водой и отфильтровывают промывную воду.
Раствору дают остыть, доливают водой до метки, перемешивают и снова отфильтровывают.
6.1.2. Озоление влажным способом (для неорганических соединений и жидких кормов)
Взвешивают 1 г или более пробы корма с погрешностью ±1 мг. Испытуемую навеску помешают в колбу Кьельдаля (и. 5.3), добавляют 20 см3 серной кислоты (и. 4.5), встряхивают так. чтобы содержимое полностью смешалось с кислотой и чтобы избежать прилипания содержимого к стенкам колбы. Смесь кислоты с навеской кипятят в течение 10 мин. Раствору дают слегка остыть, добавляют 2 см3 азотной кислоты (п. 4.4), осторожно надевают и затем раствору дают слегка остыть. Затем снова добавляют немного азотной кислоты (п. 4.4) и раствор доводят до кипения.
Процедуру повторяют до тех пор. пока не получится бесцветный раствор. Затем раствор охлаждают, добавляют немного воды и фильтруют в мерную колбу вместимостью 500 см3 (и. 5.4). Колбу Кьельдаля промывают горячей водой, которую также отфильтровывают в колбу. Раствору дают остыть, доливают водой до метки, перемешивают и снова фильтруют.
6.2. Получение окраски и измерение спектральной поглощающей способности раствора
Разбавляют кратно определенное количество полученного фильтрата (и. 6.1.1 или 6.1.2) водой, чтобы получить концентрацию фосфора не более 40 мг/см3. Переносят с помощью пипетки (п. 5.9) 10 см* этого раствора в стеклянную пробирку (п. 5.6) и добавляют с помощью другой пипетки 10 см* реактива молибдованадата (и. 4.6).
Перемешивают и дают постоять 10 мин при температуре 20 вС. Наливают раствор в измерительную кювету и измеряют его спектральную поглотительную способность на спектрофотометре (п. 5.5) при длине волны 430 нм, используя в качестве контрольного раствора раствор, полученный смешиванием 10 см* реактива молибдованадата (п. 4.6) с 10 см* воды.
6.3. Количество определений
Проводят два измерения на навесках корма, взятых от одной и той же отобранной пробы.
6.4. Построение градуировочного графика
6.4.1. Для построения градуировочного графика используют стандартный раствор фосфора (п. 4.7) и с помощью градуированных пипеток (и. 5.9) подготовляют рабочие растворы, содержащие соответственно 5; 10; 20; 30 и 40 мг/см* фосфора.
6.4.2. Наливают с помощью пипетки (п. 5.9) 10 см* каждого из этих растворов в серии из пяти пробирок (п. 5.6) и добавляют в каждую с помощью другой пипетки 10 см* реактива молибдованадата (п. 4.6).
Перемешивают и дают постоять 10 мин при 20 ’С. Измеряют спектральную поглотительную способность каждого раствора, как описано в п. 6.2.
6.4.3. Строят градуировочный график, откладывая на графике спектральную поглотительную способность и соответствующую ей концентрацию фосфора во взятых рабочих растворах (п. 6.4.1). Для концентраций фосфора в пределах 0—40 мг/см* график должен быть линейным.
6.5. Контрольное испытание
Проводят параллельно контрольное испытание, применяя ту же процедуру испытаний, те же количества реактивов, но без испытуемой пробы корма.
7. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
7.1. Массовую долю фосфора (А), выраженную в процентах, вычисляют по формуле
С 500 -Г-100 С F
Л т 106 " 20 т ’
где С— содержание фосфора в микрограммах на кубический сантиметр разбавленных кратных порций испытуемого раствора, полученное по градуировочному графику;
F— фактор взаимного разбавления кратных порций раствора (п. 6.2);
т — масса испытуемой навески, г (п. 6.1.1 или 6.1.2).
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое значение двух определений.
Результат подсчитывают до 0.01 % фосфора при массовой доле фосфора менее 3 % и до 0.1 % фосфора при массовой доле фосфора 3 % и более.
7.2. Повторяемость
Разница между результатами двух определений, проведенных сразу же одно за другим одним и тем же специалистом, не должна превышать:
3 % (относительное значение от их среднего значения) при массовой доле фосфора менее 5 %; 0.15 (абсолютное значение) при массовой доле фосфора 5 % и более.
8. ОТЧЕТОВ ИСПЫТАНИИ
В отчете должен быть указан применявшийся метод и полученные результаты. В нем также должны указываться все условия проведения испытаний, не обозначенные в настоящем международном стандарте, или условия, считающиеся необязательными, а также все обстоятельства, которые могли повлиять на результат.
В отчете должны быть указаны все детали, необходимые для полной идентификации образца.
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. ПОДГОТОВЛЕН И ВНЕСЕН ВНПО «Комбикорм»
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 28.01.91 № 65
Настоящий стандарт подготовлен методом прямого применения международного стандарта ИСО 6491—80 н полностью ему соответствует
3. ПЕРЕИЗДАНИЕ
96